數字PCR技術,是通過將微量樣品作大倍數稀釋和分液(partitioning),直至每個樣品中所含有的待測分子數不會超過1個,再將所有樣品在相同條件下進行PCR擴增,并對發(fā)生了擴增反應的樣品逐個進行計數的一種技術。特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域:拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。
有了數字PCR,在定量pcr時,我們就不用再考慮究竟是相對定量還是**定量?盡管這兩種技術有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而dPCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的**定量。
由于OpenArray平板的開放特性,數字PCR反應重復的數量可輕松調整,以滿足應用需求。它既可運行單個子陣,也可運行全部四塊平板。對于低精度的應用,您可以增加樣品通量,降低成本,而對于高精度應用,您又可以提高重復的數量,讓平臺性能大化。這種靈活性可輕松實現,又不折損性能。
dPCR技術繼續(xù)發(fā)展,形成了ddPCR技術。這就是QuantaLife公司開發(fā)出的微滴數字PCR技術。該產品還獲得了2011年度Frost & Sullivan北美新產品**獎。2011年10月,Bio-Rad公司收購了QuantaLife和ddPCR技術,推出了QX100微滴式數字PCR系統(tǒng)。
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